細(xì)胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。
由于細(xì)菌、酵母、真菌、植物都有細(xì)胞壁,但成分不同,且同類細(xì)胞結(jié)成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)不同,因此其細(xì)胞壁的堅固程度不同,總體呈現(xiàn)遞增態(tài)勢。動物細(xì)胞雖沒有細(xì)胞壁,但具有細(xì)胞膜,也需要一.定的細(xì)胞破碎方法來破膜,達(dá)到提取產(chǎn)物的目的。
常用的細(xì)胞破碎的方法有哪些?
1. 超聲波破碎法:用一.定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂,此法多適用于微生物材料,一般使用的是超聲波破碎儀。
2. 高剪切均質(zhì)乳化破碎法:高剪切均質(zhì)機(jī)主要是由轉(zhuǎn)子高速運(yùn)轉(zhuǎn)和頻率高的機(jī)械效應(yīng),讓組織或細(xì)胞細(xì)胞受到高的液相剪切力而造成細(xì)胞破碎。
3. 液氮研磨法:一般使用液氮和研缽手工研磨,適用于量少和動物臟器組織,此法對于有些亞細(xì)胞器,質(zhì)地堅硬的組織不適用。
除了以上介紹的幾種常用細(xì)胞破碎方法之外,還有磁珠法,反復(fù)凍融法,酶溶法,滲透壓法等細(xì)胞破碎方法。
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